无血清细胞冻存液(不含BSA)使用方法:
1、用细胞消化液将生长良好的细胞消化制备成单细胞悬液,离心收集细胞。
2、用细胞冻存液重悬细胞,并调整细胞浓度至0.5~6×106/ml左右。
3、在2ml冻存管中加入1 ml 细胞悬液,盖好冻存管盖子,颠倒混匀。
4、直接放入-70℃冰箱中冻存。
【注】:无需程序降温盒或其他降温程序。
5、24小时后转入液氮中存储。
【注】:对于不同细胞系,可在-70℃冰箱中保存数周至数月,但建议尽快转入液氮中长期保存。
6、复苏方法:37-42℃水浴中融化冻存的细胞,<500g离心5分钟,去除上清,培养液重悬细胞后,接种至培养皿中。
为了您的安全和健康,请在实验过程中做好防护工作。
1、用37 ℃ 水浴解冻细胞冻存液,并上下振荡数次混匀。备注:为了尽量减少污染,未使用完的细胞冻存液最好冻回-20℃,反复冻融不影响使用效果。
2. 用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞,并用细胞计数器或血球计数板计数细胞浓度。备注:悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数,不易消化成单细胞的各种293细胞等最好使用含有EDTA的胰酶进行消化。
3. 用低速离心沉淀细胞,弃去上清。备注:通常2000~3000rpm离心5~10min即可。
4. 用适量细胞 冻存液重悬细胞。备注:细胞浓度可根据情况调整为1~5×10 6 /ml,通常为3×10 6 /ml左右。
5. 按每管1ml 分装到细胞冻存管中。
更多信息:无血清细胞冻存液
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https://www.chem17.com/st431186/list_2252904.html