无血清细胞冻存液 (含BSA)使用方法:
1、用细胞消化液将生长良好的细胞消化制备成单细胞悬液,离心收集细胞。
2、用细胞冻存液重悬细胞,并调整细胞浓度至0.5~6×106/ml左右。
3、在2ml冻存管中加入1 ml 细胞悬液,盖好冻存管盖子,颠倒混匀。
4、直接放入-70℃冰箱中冻存。
【注】:无需程序降温盒或其他降温程序。
5、24小时后转入液氮中存储。
【注】:对于不同细胞系,可在-70℃冰箱中保存数周至数月,但建议尽快转入液氮中长期保存。
6、复苏方法:37-42℃水浴中融化冻存的细胞,<500g离心5分钟,去除上清,培养液重悬细胞后,接种至培养皿中。
1、冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液,此步可省略)
2. 需要程序降温(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步骤繁琐,耗时耗力
3. 含血清,细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高
4. 血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异
5. 需液氮冻存,且不能原位(如孔板)冻存
更多信息:细胞冻存液
http://www.bi-gene.com/Products-35942866.html
https://www.chem17.com/st431186/list_2252904.html